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固相RNse清除剂

发布时间:2020-02-03

固相RNse清除剂

产品及特点 


固相 RNase 清除剂(Surface RNase Erasol)是天泽基因独家开发的特殊的 RNase 灭活剂。它含有多种成分,能高效灭活固体表面的 RNase 污染,保障 RNA 工作环境的清洁。 1. 高效。本产品原液能在 5 分钟内将固体表面的多达 100 ug 的 RNase 彻底灭活,效力和速度远远高于常用的 DEPC。 2. 此外还能灭活 RNase T1、 RNase H、BAL31、 S1、Mung bean nuclease 等 RNase 和 DNase。 3. 无毒。跟强致癌的 DEPC 不同,本产品对人体没有任何毒害。 4. 使用简单。处理后不需要高压灭菌。


规格及成分 


成 份 编 号 大立盒包装本产品 3090 250 mL 喷壶 3090B - 使用手册 1 份


运输及保存 


常温运输和保存,有效期两年


自备试剂 


蒸馏水


使用方法 


水的处理:直接将固相 RNase 清除剂原液按 1:1000 的比例加入到需要处理的水中,混合均匀后室温放置 24 小时即可直接使用,得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。但如果需要溶解 RNA,建议使用液相 RNase 清除剂(CAT#:3091)。


工作平台的清洁:直接将固相 RNase 清除剂原液或 10 倍的新鲜稀释液喷于台面,5 分钟后用普通吸水纸擦净,最后用沾有固相 RNase 清除剂 1000 倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。注意:由于一般的工作平台 RNase 污染都很严重,天泽基因建议使用固相 RNase 清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。


实验仪器的清洁:用浸有固相 RNase 清除剂原液或 10 倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,最后用沾有固相 RNase 清除剂 1000 倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。用固相 RNase 清除剂原液处理金属器械的时间不能超过 5 3090sc 分钟。注意:由于一般的实验仪器 RNase 污染都很严重,天泽基因建议使用固相 RNase 清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。


玻璃和塑料器皿的清洁:将器皿浸泡在固相 RNase 清除剂的 10 或 100 倍的新鲜稀释液中,静置处理 5 分钟后取出,再用固相 RNase 清除剂 1000 倍或 10000 倍新鲜稀释液浸泡二次以上,倒立晾干后备用。注意:由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的 RNase 污染都比较严重(但一般比工作平台和实验仪器干净),天泽基因建议第一次浸泡使用固相 RNase 清除剂的 10 倍或 100 倍新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于 1000 倍的稀释液。


移液枪的清洁:根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在固相 RNase 清除剂的 10 或 100 倍的新鲜稀释液中一分钟,再用固相 RNase 清除剂 1000 倍或 10000 倍新鲜稀释液彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。


塑料离心管和滴头的清洁: 将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在固相 RNase 清除剂的 1000 倍的新鲜稀释液中 5 分钟以上(最好不要有气泡), 然后再用固相 RNase 清除剂 1000 倍或 10000 倍的新鲜稀释液充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。


技术资料 


如何检测本产品灭活 RNase 的效果在两个 1.5mL 塑料离心管中分别加入RNase 溶液,使RNase总量在 10-100 ug 之间,自然晾干(需要一天左右)或加热使水份蒸发,一个样品加入 1 mL 本产品原液,另一个样品加入 1 mL 无 RNase 的水(对照),室温静置五分钟(注意不要让管壁上产生气泡,因为它会阻挡溶液与管壁上 RNase 分子的结合),然后小心吸出溶液并加入 1 mL 水,静置 1 分钟后小心吸出,重复水洗步骤一次,最后加入 2.5 ug 总 RNA 样品, 37℃保温 30 分钟后加 RNA 电泳上样液,电泳观察 RNA 分子的完整性。完整的 RNA 表示该管中 RNase 已经被灭活。


固相 RNase 清除剂稀释度与 RNase 的灭活效果的关系 


RNase 量(1.5mL 离心管中) 稀释度 0.5 ug 5 ug 50 ug 100 ug 原液 + + + + 10 倍稀释 + + + + 100 倍稀释 + + + - 1000 倍稀释 + - - -


表注:所有灭活条件均为室温静置放置 5 分钟,“+”表示百分百灭活,“-”表示部分灭活或不能灭活。RNase 为液体溶液加入到 1.5 mL 塑料离心管中晾干而得,稀释液为新鲜稀释。


相关资料 


远离 EPC 的三大理由 1.DEPC 对人体有害。DEPC 为高活性烷化试剂,能对蛋白质进行共价修饰,使其组胺基团的乙氧基甲酸化(RNase A 活性位点有两个组氨酸,故能被灭活);同时它还能使 RNA 分子中没配对的腺嘌呤羧甲基化,改变其活性,严重时甚至会影响 RNA 形成杂交双链的能力。由于上述反应没有选择性,故对人体十分有害,归为强致癌物,使用时必须十分小心。 2.不能用 DEPC 处理下列溶液:一是含一级胺的试剂,如 MOPS,TRIS, HEPES,PBS 等,因其所含一级胺是 DEPC 攻击的目标,它们之间会发生化学反应;二是不能高压灭菌的溶液(如 DTT,dNTP,MgCl2等),因为 DEPC 必须通过高压灭菌去除;三是不能用于某些高浓度的溶液(如 0.1 M NH4Ac 或 NaAc),在这些溶液中 DEPC 的半衰期只有几分钟;四是不能用于 pH 值在 4 及以下的溶液,在此条件下 DEPC对 RNase没有灭活作用;五是 DEPC不能与 Polycarbonate 和 Polystyrene 等塑料材料接触。 3.DEPC 溶液不适合用于某些实验;一不能用于测 OD,因为 OD 读数跟 pH 有关,DEPC 在溶液中分解后变成乙醇和 CO2,部分 CO2与水反应形成碳酸,导致 pH 降低,进而降低 OD 值。二不能用于体外转录,Ambion 报道 0.1% DEPC-treated water 能使转录效率降低 40%,这可能与 DEPC 降解产物有关。


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